Uso y método de preparación del agente tampón biológico PIPES en polvo

Reserva biológicaPIPESEl polvo es un reactivo químico ampliamente utilizado en experimentos biológicos, y su nombre completo es ácido piperazina-1,4-dietanosulfónico.La solución de PIPES desempeña un papel importante en el mantenimiento de la estabilidad del ambiente intracelular y en la protección de las células contra las fluctuaciones del pHEste artículo proporcionará una introducción detallada de las propiedades, usos y métodos de preparación del agente biológico tampón PIPES en polvo.

PIPES es un reactivo químico en polvo blanco con fórmula química C8H12N2O4S y un peso molecular de 248.26Es un agente amortiguador zwitteriónico con capacidad de amortiguador de pH estable, capaz de mantener un cierto valor de pH en ambientes ácidos o alcalinos.Los tubos también tienen una alta resistencia iónica y baja permeabilidad, por lo que se utiliza ampliamente en experimentos biológicos como el cultivo celular, la electroforesis y el inmunoblot.

La aplicación de los PIPES de amortiguación biológica en experimentos biológicos

El polvo de PIPES, como amortiguador biológico, se ha utilizado ampliamente en muchos experimentos biológicos.

1Cultivo celular: en los experimentos de cultivo celular, PIPES puede servir como tampón de pH para mantener la estabilidad del pH del medio de cultivo y garantizar el crecimiento y la división celulares normales.Puede servir como portador de iones para facilitar el intercambio de iones dentro y fuera de la célula, afectando las funciones fisiológicas de la célula.

2. Electróforesis: en experimentos de electroforesis, el polvo PIPES se puede utilizar como tamiz molecular e intercambiador de iones para mejorar la resolución y la eficacia del experimento.en experimentos de electroforesis de proteínas, PIPES puede unirse a las proteínas, ralentizando su movimiento en un campo eléctrico, mejorando así la resolución del experimento

3. Inmunoblotting: En el experimento de inmunoblotting, PIPES se puede utilizar como el componente principal del amortiguador transmembrana para ayudar a transferir proteínas del gel a la membrana.PIPES también puede servir como portador de iones para mejorar la sensibilidad y especificidad de los experimentos.

4- Purificación de proteínas de microtúbulos: en los experimentos de purificación de proteínas de microtúbulos,PIPES puede servir como el componente principal del amortiguador para ayudar en la extracción y purificación de proteínas de microtúbulos de tejidosTambién puede inhibir la reacción de polimerización de las proteínas de los microtúbulos y mejorar la eficiencia de purificación.

5. Localización del peroxisoma: En los experimentos de localización del peroxisoma, PIPES puede servir como el componente principal del amortiguador para ayudar en la localización ultrastructural de los peroxisomas en las células.También puede proteger a las células de los daños de los peroxisomas.

Además de las áreas de aplicación antes mencionadas, PIPES también se puede aplicar en experimentos biológicos tales como la separación y purificación de ácidos nucleicos y proteínas, cristalización de proteínas,En resumen, como un importante amortiguador biológico, desempeña un papel indispensable en muchos experimentos biológicos.

Método de preparación de los PIPES de amortiguador biológico

1Prepara los reactivos y equipos necesarios.

PIPES en polvo, agua ultrapura, botella de vidrio, papel de pesaje, balanza electrónica, agitador magnético u oscilador de vórtice.

2. Pesar el polvo de tuberías

Pese con precisión el polvo de PIPES utilizando una balanza electrónica basada en la concentración y el volumen requeridos.Se deben pesar 7 g de PIPES en polvo..

3Disolver el polvo de PIPES

Añadir el polvo PIPES pesado en una botella de vidrio, añadir una cantidad adecuada de agua ultrapura y luego mezclar con un agitador magnético u oscilador de vórtice hasta disolverse.Tenga en cuenta que debe utilizarse suficiente agua ultrapura para garantizar la disolución completa.

4Filtración y esterilización

Filtrar y esterilizar la solución preparada de PIPES para eliminar las impurezas y las bacterias de la solución.

5Almacenamiento y uso

Conservar la solución filtrada de PIPES en un frasco de vidrio limpio y en un refrigerador a 4 °C.Se debe añadir una cantidad adecuada de solución PIPES de acuerdo con los requisitos experimentales..

Precauciones para el uso de los PIPES de amortiguación biológica

1. El polvo de tuberías tiene higroscopicidad, por lo que debe almacenarse en un ambiente seco para evitar la humedad;

2Durante el proceso de configuración, se debe utilizar agua ultrapura o agua desionizada para garantizar la pureza y calidad de la solución.

3Si se produce turbidez o precipitación, puede deberse a la disolución incompleta del polvo o a la presencia de impurezas.y debe ser reconfigurado;

4La solución preparada debe consumirse en el tiempo especificado para evitar un almacenamiento prolongado que pueda afectar a la calidad y eficacia de la solución.

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